Бактеріальний рак виноградної лози та перспективи його біологічного контролю

Людмила Конуп, Мирослав Піковський, Микола Рябий, Анастасія Конуп, Микола Кирик
Анотація

Актуальність дослідження обумовлена поширенням бактеріальних хвороб винограду на півдні України та необхідністю удосконалення методів ідентифікації патогену й засобів захисту. Метою було роботи було встановити ареал бактеріального раку винограду  в Одеській області та розробити профілактичні заходи на основі біологічного методу. У роботі проводили обстеження промислових насаджень на наявність симптомів хвороби та її поширення у польових умовах. Використовували молекулярно-біологічний метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР) у реальному часі для ідентифікація збудника бактеріального раку. Дослідження проводились відповідно до атестованої методики. Для ідентифікації фітопатогенів використовували обладнання ПЛР-лабораторії. У результаті фітосанітарного обстеження виноградних насаджень різних господарств в Одеській області були виявлені кущі виноградних рослин з характерними симптомами бактеріального раку, з пухлинними наростами тканини в різних місцях рослин: на рукавах, штамбі, місцях щеплення. Загалом у районі проведення досліджень бактеріальний рак винограду характеризується широким ареалом. За результатами фітосанітарного обстеження поширення бактеріального раку винограду на різних сортах становило від 0,3 до 35 %. У режимі реального часу методом ПЛР було ідентифіковано збудника хвороби – A. tumefaciens. Хвороба проявлялася у вигляді характерних симптомів, a також розвивалася у латентній формі. Розроблена мультиплексна ПЛР дозволяє одразу аналізувати різні штами патогенних ізолятів агробактерій. Серед більшості виділених ізолятів, які в подальшому були протестовані на пригнічення пухлин, було виявлено два ізоляти агробактерій: ІЛВМ1 і ІЛВМ2, які мали високі показники антагоністичних властивостей щодо збудника бактеріального раку. Перевірка патогенності вилучених агробактерій на тест-рослинах томатів і соняшнику підтвердили результати визначення цих властивостей, отриманих іn vitro. Ізоляти агробактерій ІЛВМ1 і ІЛВМ2 значно інгібували ріст пухлин на стеблах тест-рослин порівняно з патогенним штамом, тому їх в подальшому можна використовувати проти збудника бактеріального раку і захисту виноградних рослин від вторинного ураження патогеном із ґрунту. Результати можуть бути використані для вдосконалення методів біологічного захисту рослин від бактеріальних інфекцій

Ключові слова

хвороби винограду, полімеразна ланцюгова реакція, Agrobacterium tumefaciens, бактерії-антагоністи, біологічний захист

ЦИТУВАТИ
Konup, L., Pikovskyi, M., Riabyi, M., Konup, A., & Kyryk, M. (2024). Crown gall of grapevine and prospects for its biological control. Plant and Soil Science, 15(3), 54-67. https://doi.org/10.31548/plant3.2024.54
Використані джерела

[1] Abolmaaty, A., Vu, C., Oliver, J., & Levin, R. (2000). Development of a new lysis solution for releasing genomic DNA from bacterial cells for amplification by polymerase chain reaction. Microbios, 101, 181-189.

[2] Ben Abdallah, D., Frikha-Gargouri, O., & Tounsi, S. (2015). Bacillus amyloliquefaciens strain 32a as a source of lipopeptides for biocontrol of Agrobacterium tumefaciens strains. Journal of Applied Microbiology, 119, 196-207. doi: 10.1111/jam.12797.

[3] Chopra, S., Palencia, A., Virus, C., Schulwitz, S., Temple, B.R., Cusack, S., & Reader, J. (2016). Structural characterization of antibiotic self-immunity tRNA synthetase in plant tumour biocontrol agent. Nature Communications, 7, article number 12928. doi: 10.1038/ncomms12928.

[4] Convention on Biological Diversity. (1992, June). Retrieved from https://zakon.rada.gov.ua/laws/show/995_030#Text

[5] Convention on the Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora. (1973, June). Retrieved from https://zakon.rada.gov.ua/laws/show/995_129#Text.

[6] DSTU 3355:1996. (1997). Agriculturвl products of plant. Technigue of inspection and sampling for guarantine examination and expertise. Retrieved from https://online.budstandart.com/ua/catalog/doc-page.html?id_doc=91446.

[7] DSTU 4390:2005. (2006). Grape rootings and vine cuttings. Specifications. Retrieved from https://online.budstandart.com/ua/catalog/doc-page.html?id_doc=91479.

[8] Ferrigo, D., Causin, R., & Raiola, A. (2017). Effect of potential biocontrol agents selected among grapevine endophytes and commercial products on  disease. BioControl, 62, 821-833. doi: 10.1007/s10526-017-9847-3.

[9] Frikha-Gargouri, O., Ben Abdallah, D., Bhar, I., & Tounsi, S. (2017). Antibiosis and bmyB gene presence as prevalent traits for the selection of efficient bacillus biocontrol agents against  disease. Frontiers in Plant Science, 8, article number 1363. doi: 10.3389/fpls.2017.01363.

[10] Guo, M., Ye, J., Gao, D., Xu, N., & Yang, J. (2019). Agrobacterium-mediated horizontal gene transfer: mechanism, biotechnological application, potential risk and forestalling strategy. Biotechnology Advances, 37(1), 259-270. doi: 10.1016/j.biotechadv.2018.12.008.

[11] Haas, J.H., Moore, L.W., Ream, W., & Manulis, S. (1995). Universal PCR primers for detection of phytopathogenic Agrobacterium strains. Appl. Environ. Microbiol., 61(8), 2879-2884. doi: 10.1128/AEM.61.8.2879-2884.1995.

[12] Hao, Y., Charles, T.C., & Glick, B.R. (2011). ACC deaminase activity in avirulent Agrobacterium tumefaciens D3. Canadian Journal of Microbiology, 57, 278-286. doi: 10.1139/w11-006.

[13] ISO 16578:2022. (2022). Molecular biomarker analysis – requirements for microarray detection of specific nucleic acid sequences. Retrieved from https://www.iso.org/standard/80968.html.

[14] Kawaguchi, A., & Nita, M., Ishii, T., Watanabe, M., & Noutoshi, Y. (2019). Biological control agent Rhizobium (=Agrobacterium) vitis strain ARK-1 suppresses expression of the essential and non-essential vir genes of tumorigenic R. vitis. BMC Research Notes, 12, article number 1. doi: 10.1186/s13104-018-4038-6.

[15] Kawaguchi, A., Inoue, K., Tanina, K., & Nita, M. (2017). Biological control for grapevine  using nonpathogenic Rhizobium vitis strain ARK-1. Proceedings of the Japan Academy, Series B, 93(8), 547-560. doi: 10.2183/pjab.93.035.

[16] Konup, A., Muliukina, N., & Konup, L. (2019). Detection of virus, bacterial and phytoplasmic diseases on vineyards of Odesa oblast. Bulletin of Agricultural Science, 4(793), 24-29. doi: 10.31073/agrovisnyk201904-04.

[17] Kovaleva, I.A., Janse, L.A., Konup, L.A., Zelenyanskaya, N.N., Vlasov, V.V., Konup, A.I., Muljukina, N.A., Kyryk, N.N., & Pikovskyi, M.Y. (2022). Detecting the infection of the cabernet sauvignon variety of clonal origin by grape viruses. Cytology and Genetics, 56(6), 504-512.

[18] Lacroix, B., & Citovsky, V. (2019). Pathways of DNA transfer to plants from Agrobacterium tumefaciens and related bacterial species. Annual Review of Phytopathology, 57(1), 231-251. doi: 10.1146/annurev-phyto-082718-100101.

[19] Lehoczky, J. (1971). Further evidences concerning the systemic spreading of Agrobacterium tumefaciens in the vascular system of grapevines. Vitis, 10, 215-221.

[20] Lemanova, N., & Magher, M. (2019). Biological method for prevention grown gall in horticulture, Microbiological Journal, 81(2), 36-40. doi: 10.15407/microbiolj81.02.036.

[21] Limanska, N.V., Galkin, M.B., Ivanytsia, V.O. (2019). Effect of Lactobacillus plantarum on survival of  agent and tumour formation. Microbiological Journal, 81(1), 22-33. doi: 10.15407/microbiolj81.01.022.

[22] Meyer, T., Thiour-Mauprivez, C., Wisniewski-Dyé, F., Kerzaon, I., Comte, G., Vial, L., & Lavire, C. (2019). Ecological conditions and molecular determinants involved in Agrobacterium lifestyle in tumors. Frontiers in Plant Science, 10, article number 978. doi: 10.3389/fpls.2019.00978.

[23] Nguyen-Huu, T., Doré, J., Aït Barka, E., Lavire, C., Clément, C., Vial, L., & Sanchez, L. (2020). Development of a DNA-based real-time PCR assay to quantif Allorhizobium vitis over time in grapevine (Vitis vinifera L.) plantlets. Plant Disease, 105(2), 384-391. doi: 10.1094/PDIS-04-20-0732-RE.

[24] Noutoshi, Y., Toyoda, A., Ishii, T., Saito, K., Watanabe, M., & Kawaguchi, A. (2020). Complete genome sequence data of tumorigenic Rhizobium vitis strain VAT03-9, a causal agent of grapevine  disease. Molecular Plant-Microbe Interactions, 33, 1280-1282. doi: 10.1094/MPMI-07-20-0180-A.

[25] Pan, H., Xiao, Y., Xie, A., Li, Z., Ding, H., Yuan, X.J., Sun, R., & Peng, Q. (2022). The antibacterial mechanism of phenylacetic acid isolated from Bacillus megaterium L2 against Agrobacterium tumefaciens. Peer J., 10, article number e14304. doi: 10.7717/peerj.14304

[26] Peñalver, R., Vicedo, B., & López, M.M. (2000). Use of the genetically engineered Agrobacterium strain K1026 for biological control of . European Journal of Plant Pathology, 106(9), 801-810. doi: 10.1023/A:1008785813757.

[27] Qing, G.E., Huanduo, X.U., Jiale, W., Chuwei, Y.U., Wei, L., & Xu, L. (2024). Identification of pathogenic bacteria and screening of control agents for wine grape  disease in the Western Sichuan Plateau. Journal of Fruit Science, 41(8), 1636-1648. doi: 10.13925/j.cnki.gsxb.20240116.

[28] Sawant, I. (2023). Microbes in management of fungal diseases of grape. Grape Insight, 1(2), 59-69. doi: 10.59904/gi.v1.i2.2023.17.

[29] Stockwell, V., Kawalek, M., Moore, L.W., Loper, J.E., Stockwell, V., Stockwell, V.O., Kawalek, M., Moore, L., Loper, J., Moore, W., & Loper, E. (1996). Transfer of pAgK84 from the biocontrol agent Agrobacterium radiobacter K84 to A. tumefaciens under field conditions. Phytopathology, 86, 31-37. doi: 10.1094/Phyto-86-31.

[30] Thompson, M.G., Moore, W.M., Hummel, N.F.C., Pearson, A.N., Barnum, C.R., Scheller, H.V., & Shih, P.M. (2020). Agrobacterium tumefaciens: A bacterium primed for synthetic biology. BioDesign Research, 2020, article number 8189219. doi: 10.34133/2020/8189219.

[31] Tzfira, T., Hohn, B., & Gelvin, S. (2017). Transfer of genetic information from agrobacterium to plants. Reference Module in Life Sciences. doi: 10.1016/B978-0-12-809633-8.07278-2.

[32] Wang, Y., Zhang, S., Huang, F., Zhou, X., Chen, Z., Peng, W., & Lu, M. (2017). VirD5 is required for efficient Agrobacterium infection and interacts with Arabidopsis VIP2. New Phytologist, 217(2), 726-738. doi: 10.1111/nph.14854.

[33] Wei, Q., Li, J.Y., Wang, J.H., & Wang, H.M. (2009). Strain E26 of Agrobacterium vitis, a biological control agent of grapevine , does not contain virA and virG pathogenicdeterminants. Journal of Phytopathology, 157, 657-665. doi: 10.1111/j.1439-0434.2009.01544.x.

[34] Wong, A.T., Kawaguchi, A., & Nita, M. (2021). Efficacy of a biological control agent Rhizobium vitis ARK-1 against Virginia R. Vitis isolates, and relative relationship among Japanese and Virginia R. vitis isolates. Crop Protection, 146. doi: 10.1016/j.cropro.2021.105685.

[35] Yepes, L.M., Burr, T., Reid, C., & Fuchs, M. (2019). Elimination of the  pathogen, Agrobacterium vitis, from systemically infected grapevines bytissue culture. American Journal of Enology and Viticulture, 70(3), 243-248. doi: 10.5344/ajev.2019.18083.